材料來源:英國。參考試劑(編碼18/132d)和基因組DNA稀釋劑(18/142)是一批安瓿,每批安瓿含有約5µg從人類細(xì)胞系中提取的冷凍干燥和純化的基因組DNA。使用“鹽析"法提取基因組DNA,并在冷凍干燥前用5mg/mL海藻糖在Tris-EDTA緩沖液中稀釋。
使用說明:參考試劑用于通過數(shù)字PCR(dPCR)定量慢病毒載體拷貝數(shù)。參考試劑由世界衛(wèi)生組織(世界衛(wèi)生組織)生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會于2022年建立,由裝有冷凍干燥、純化的基因組DNA的安瓿組成,用于通過數(shù)字PCR(dPCR)(18/132d)定量慢病毒載體拷貝數(shù),并配有用于制備參考試劑18/132d的進(jìn)一步稀釋液的純化基因組DNA稀釋劑(18/142)安瓿。
建議最終用戶使用提供的基因組DNA稀釋劑(18/142)進(jìn)行18/132d的連續(xù)稀釋,以產(chǎn)生用于估計(jì)未知樣本中LV拷貝數(shù)的基因組DNA計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。這些材料不應(yīng)用于任何其他用途。數(shù)據(jù)分析必須集中在慢病毒載體整合上。
儲存運(yùn)輸:將所有未開封的冷凍干燥材料安瓿儲存在-20°C或以下。請注意,由于凍干材料的固有穩(wěn)定性,NIBSC可能會在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。
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