其實(shí)一句話來(lái)概括就是:內(nèi)標(biāo)物是用來(lái)定量的,而替代物是監(jiān)控整個(gè)分析過(guò)程的。
所以替代物(surrogate)必定是在測(cè)試初始就加入,而內(nèi)標(biāo)物(internal standard)加入時(shí)間一般在定容時(shí)。
內(nèi)標(biāo)物和替代物定義
內(nèi)標(biāo)物–是加到樣品、提取物或標(biāo)準(zhǔn)溶液中已知量的純物質(zhì),是用來(lái)測(cè)定同一溶液中其它分析物質(zhì)和替代物的相對(duì)響應(yīng)值。內(nèi)標(biāo)物質(zhì)必須是分析的樣品組分中所不含有的,一般是目標(biāo)物的氘代物,用來(lái)體現(xiàn)目標(biāo)物的基底效應(yīng)。
替代物–是一種在任何樣品中都不可能被發(fā)現(xiàn)的純物質(zhì),其在樣品提取和進(jìn)行其它處理前被加入的等分和量是已知的。它的量是同樣品中其它組分一樣被測(cè)定,它的作用是監(jiān)控每個(gè)樣品的方法性能。
它是一種與目標(biāo)物性質(zhì)相近的物質(zhì),一般在前處理之前加,用來(lái)表征整個(gè)前處理過(guò)程的損失或回收率。只是用來(lái)監(jiān)測(cè)萃取效率,一般認(rèn)為其回收率在某一范圍(不同標(biāo)準(zhǔn)要求不同)內(nèi)即認(rèn)為萃取結(jié)果可以定量作為檢查結(jié)果。
異同點(diǎn)
首先都要在標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入替代加標(biāo)物和內(nèi)標(biāo),兩者最主要的區(qū)別在于加入的時(shí)間點(diǎn),萃取前加入,通過(guò)最后萃取液的定量,可以確定整個(gè)過(guò)程的萃取效率及損失,而進(jìn)樣前加入可以修正進(jìn)樣誤差,替代加標(biāo)物如在標(biāo)液中選擇為內(nèi)標(biāo),就可以修正全過(guò)程誤差,如果視為外標(biāo),主要是監(jiān)控回收效率。
內(nèi)標(biāo)法在具體做的時(shí)候其實(shí)包括兩部分吧,一個(gè)是內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制;一個(gè)是樣品前處理。在繪制內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),縱、橫坐標(biāo)中,一個(gè)是濃度,一個(gè)比值(待分析物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比,內(nèi)標(biāo)物的濃度是固定的),待分析物的濃度是通過(guò)把比值(待分析物與內(nèi)標(biāo)物的比值)代人內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出的,樣品處理雖然會(huì)使內(nèi)標(biāo)物有所損失,但是由于待分析物與內(nèi)標(biāo)物濃度是同方向變化的,并不影響定量結(jié)果,這也是內(nèi)標(biāo)法的一個(gè)優(yōu)勢(shì)所在。
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