材料說明
在1mmol/L三(羥甲基)氨基甲烷緩沖液中含有基因組λDNA(TRIS)和0.01mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)在pH 8.0下。每個小瓶包含約1.1mL溶液。對ERM-AD442k的純度進行了研究結(jié)論是ERM-AD442k含有可忽略不計的大腸桿菌DNA。DNA質(zhì)量濃度通過紫外分光光度法根據(jù)方程a計算,使用μL的變性DNA。通過dPCR的DNA拷貝數(shù)濃度使用方程式b。
用于認證的分析方法
數(shù)字聚合酶鏈式反應(yīng)測定DNA拷貝數(shù)濃度下一代測序(即羅氏公司的Illumina和GS Junior),以確定λDNA,用于識別和量化雜質(zhì)定量PCR以量化雜質(zhì)紫外分光光度法測定DNA質(zhì)量濃度
安全信息
適用通常的實驗室安全預(yù)防措施。使用說明和預(yù)期用途
使用說明
需要小心地重復(fù)倒置或混合以確保λDNA的均勻溶液。解凍將小瓶在4°C下放置過夜。將小瓶及其內(nèi)含物加熱至室溫然后將小瓶中的內(nèi)容物溫和地均勻化10分鐘。這種均勻化這個過程需要再次重復(fù)。我們建議避免“侵入性"攪拌,以消除污染也不建議向上/向下移液以避免DNA剪切力。是的建議ERM-AD442k的凍融次數(shù)不要超過5次,以保持DNA的一致性質(zhì)量濃度。因此,強烈建議在第一次解凍后均質(zhì)。小瓶應(yīng)在層流下打開和處理,以降低污染風(fēng)險。
預(yù)期用途
這種材料的主要用途是用作校準器。該材料及其認證價值旨在用于校準DNA定量方法,如Quant iTTM PicoGreen®dsDNA檢測試劑盒(Life Technologies)或DNAQF定量試劑盒(Sigma-Aldrich),質(zhì)量控制和評估方法性能,即檢查分析結(jié)果或校準的準確性,因為該λDNA校準器用途廣泛,用途廣泛。作為任何參考材料,它也可用于建立控制圖表或用于驗證研究。與認證值相比,材料的指示值為不確定性被認為太大而無法進行認證,因此可靠性低于認證價值。DNA定量方法。用作校準品建議使用這種材料作為校準器。應(yīng)考慮認證值的不確定性在估計測量不確定度時考慮。
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