1、細胞換液是否需要用PBS清洗
我們知道,在“貼壁細胞傳代"中,培養(yǎng)基中的血清會抑制胰酶的活性,影響消化的效果,所以必須要PBS 的清洗。但對于細胞換液,尚未查到有資料明確說明是否需要PBS清洗。我覺得這里應該根據(jù)細胞的具體情況考慮:
1.若細胞比較“嬌氣"或生長狀態(tài)不是特別好時,建議還是不要用PBS清洗。
一方面,細胞貼壁的狀態(tài)可能不是很牢固,PBS的沖洗會破壞細胞的貼壁狀態(tài);另一方面,PBS可能會洗掉細胞分泌的一些生長因子,這同樣不利于細胞狀態(tài)的調整。如果一定要洗,可以緩慢清洗,減少對細胞的傷害
2.當細胞生長狀態(tài)不錯,或者顯微鏡下觀察細胞液中不是很干凈時,可以選擇用PBS清洗。
一方面可以去除積累的代謝物;另一方面,也可將一些生長狀態(tài)不好或衰老的細胞洗脫下來,保持細胞活力。
2、什么是“細胞半換液"
“細胞半換液"又稱“細胞半量換液",即棄掉一半舊的培養(yǎng)基,再加一半新的進去。選它的原因其實與前面不加PBS的理由有點相近。
其原因包括:
1.給細胞提供適應的緩沖環(huán)境;
2.細胞生長過程中可能會分泌某些生長因子,促進生長。
3.節(jié)省材料
4.方便操作:比如96孔板,換液很麻煩。所以常采用排槍進行半換液
5.對于懸浮細胞的培養(yǎng),有時也會選用半換液減低細胞密度
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