一、如何區(qū)分不同級別的生物安全柜?
生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的。
生物安全柜可分為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級。
Ⅰ級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風(fēng)機。Ⅱ級生物安全柜是目前應(yīng)用廣泛的柜型。 與Ⅰ級生物安全柜一樣,Ⅱ級生物安全柜也有氣流流入前窗開口,被稱作“進氣流",用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全柜不同的是,未經(jīng)過濾的進氣流會在到達工作區(qū)域前被進風(fēng)格柵俘獲,因此試驗品不會受到外界空氣的污染。
Ⅱ級生物安全柜的一個獨te之處在于經(jīng)過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下,被稱作“下沉氣流"。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區(qū)域,以保護柜中的試驗品不被外界塵?;蚣毦廴?。因此,所有的Ⅱ級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。
Ⅲ級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設(shè)計的,是目前世界上zui高安全防護等級的安全柜。柜體完quan氣密,全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險的生物試驗。
二、Ⅱ級生物安全柜的分類及選型有哪些?
Ⅱ級生物安全柜按排放氣流占系統(tǒng)總流量的比例及內(nèi)部設(shè)計結(jié)構(gòu),將其劃分為A1、A2、B1、B2四個類型。
A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.4m/s。安全柜內(nèi)70%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環(huán)至工作區(qū),30%氣體通過排氣口的高效空氣過濾器排出。安全柜內(nèi)的污染氣流經(jīng)過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風(fēng)管道排到大氣中。
A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。安全柜內(nèi)的污染氣流經(jīng)過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風(fēng)管道排到大氣中。安全柜的負壓環(huán)繞污染區(qū)域的設(shè)計,阻止了柜內(nèi)物質(zhì)的泄漏。
B1型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.50m/s,柜內(nèi)氣體中30%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環(huán)使用,70%氣體通過排氣口HEPA過濾器過濾后通過專用風(fēng)道排入大氣中。所有被生物污染的部位均應(yīng)保持負壓,或被負壓的通道和負壓通風(fēng)系統(tǒng)包圍。
B2型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.5m/s,柜內(nèi)下降氣流全部是由柜外供給,即安全柜排出的氣體不再循環(huán)使用。柜內(nèi)的氣流經(jīng)過濾后排入大氣,不允許再進入安全柜循環(huán)或返流回實驗室,可同時提供生物性和化學(xué)性的安全控制。所有污染部位均應(yīng)處于負壓狀態(tài)或者被負壓區(qū)包圍。
三、生物安全柜檢測依據(jù)什么標(biāo)準(zhǔn)?
生物安全柜檢測現(xiàn)行的主要標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)有:
(1)歐盟EN 12469:2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》
(2)美國NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow) Biosafety Cabinetry》;
(3)JG 170-2005中華人民共和國建筑工業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《生物安全柜》;
(4)YY 0569-2011中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《Ⅱ級生物安全柜》。
鑒于生物安全柜危險的使用環(huán)境,在安裝時以及以后每隔一定時間,要由具有CMA檢測資質(zhì)與能力的第三方檢驗檢測機構(gòu)按照規(guī)定對每一臺生物安全柜的整體運行性能進行性能檢測,以檢查其是否符合國家及國際的性能標(biāo)準(zhǔn)保證使用者的安全。
四、生物安全柜檢測主要檢測哪些指標(biāo)?
生物安全柜檢測主要包括物理學(xué)檢測和生物學(xué)檢測兩個方面,根據(jù)檢測性質(zhì)可分為首ci檢測、后續(xù)檢測。除生物安全柜的一年一度的常規(guī)檢測外,下列情況之一時,如安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后,也必須進行現(xiàn)場生物安全柜檢測。
按照《Ⅱ級生物安全柜》(YY0569-2015)、《生物安全柜》(JG170-2005)和《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)要求,Ⅱ級生物安全柜檢測指標(biāo)包括高效過濾器檢漏、潔凈度、下降氣流流速、工作窗口進口平均風(fēng)速、溫升、氣體流向、照度、噪聲、振幅、紫外線燈強度。安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后還必須加測柜檢漏和人員安全性、受度樣本安全性和交叉感染。Ⅲ級生物安全柜還須檢測靜壓差。
五、使用生物安全柜有哪些注意事項?
(1)超凈工作臺≠生物安全柜。超凈工作臺看似和生物安全柜非常相似,但超凈工作臺只保護工作區(qū)的樣品免受外部環(huán)境污染,并不能保護操作人員。
(2)請勿使用生物安全柜處理有毒、易燃、易爆等材料。
(3)應(yīng)避免使用明火。因明火產(chǎn)生的熱效應(yīng)會干擾生物安全柜操作區(qū)內(nèi)的氣流穩(wěn)定,且火焰熱氣會影響濾器的壽命。如必須使用,可根據(jù)需要選取即用即燃式滅菌器具或微型接觸式燃燒器。
(4)請勿在生物安全柜內(nèi)擺放過多物品,否則會影響安全柜氣流和安全性能。
(5)合理選擇生物安全柜的安裝地點。應(yīng)當(dāng)盡量遠離外部氣流干擾因素,例如門窗、空調(diào)通風(fēng)口、人員過道以及其他實驗室氣流干擾設(shè)備(安全柜、通風(fēng)櫥等)。
(6)生物安全柜中一般不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話,應(yīng)該每周進行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
(7)在安全柜使用前后,請按照程序為安全柜進行表面除菌。使用適當(dāng)?shù)南緞?,例?0%的異丙醇溶劑擦拭安全柜的工作區(qū)表面,包括前后的近期格柵。
(8)注意安全柜自凈周期。開啟關(guān)閉安全柜時,讓安全柜自主運行3-5分鐘的自凈周期。這個自凈程序可以清除安全柜的工作區(qū)域內(nèi)可能存在的經(jīng)空氣傳播的污染物。
(9)確保安全柜在工作時前窗處于正確的額定操作高度。
(10)正確著裝為操作中提供必要保護。當(dāng)進行高危險性操作,例如生物安全水平2+到3級操作時,應(yīng)選用長袖、背面開口的隔離衣和兩副手套,并確保外層手套套住隔離衣袖口。不能有暴露在外的肌膚。
(11)在安全區(qū)域內(nèi)進行操作。切勿阻塞工作區(qū)前后的通風(fēng)格柵。盡量在工作區(qū)的中心部位進行操作。
(12)遵循清潔區(qū)到污染區(qū)的操作原則。生物安全柜的工作區(qū)應(yīng)該被依次劃分為三個區(qū)域:清潔區(qū)、工作區(qū)和污染區(qū)。生物危害性廢棄物袋應(yīng)放置在污染區(qū)內(nèi);實驗儀器和樣品應(yīng)放置在工作區(qū)域;而實驗供給品應(yīng)放置在潔凈區(qū)內(nèi)。在工作臺面上的實驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行。
六、如何判斷高效過濾器需要更換?
(1)風(fēng)速變小。當(dāng)檢測發(fā)現(xiàn)潔凈度指標(biāo)正常、下降氣流或流入氣流流速變小時;或者設(shè)備在運行過程中,若設(shè)備發(fā)出聲光報警且是因下降氣流或流入氣流流速低造成的(顯示窗口分別所顯示數(shù)值低于設(shè)計要求)說明過濾器堵塞己十分嚴重,風(fēng)機轉(zhuǎn)速己達到最大值,系統(tǒng)無論如何調(diào)整都無法達到規(guī)定的風(fēng)速值,此時必須更換過濾器。
(2)壓力傳感器報警。當(dāng)壓力指示器顯示值大于170Pa時報警系統(tǒng)報警。
(3)檢測高效過濾器完整性發(fā)現(xiàn)有泄漏。
(4)氣流模式改變時。通過檢測發(fā)現(xiàn),垂直氣流(下降氣流)出現(xiàn)死角和回流,有煙霧從柜內(nèi)泄漏出來,或進入柜內(nèi)的煙霧有外逸時。
(5)控制面板上的風(fēng)機累計運行時間,如果達到10000小時,通常需要更換過濾器,但不是必須更換,還要考慮使用環(huán)境的潔凈程度,使用習(xí)慣等。
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