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SRM1649b標(biāo)準(zhǔn)品作用于皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT細(xì)胞及皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF),檢測(cè)分析其老化相關(guān)分子標(biāo)志、信號(hào)通路的分子及基因表達(dá)水平,旨在探索PM2.5的空氣顆粒性污染物中的多環(huán)芳烴化合物是否引起正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞及皮膚成纖維細(xì)胞老化的作用,明確多環(huán)芳烴化合物引起皮膚細(xì)胞老化的具體分子機(jī)制。
純度測(cè)定：
?. 配同等濃度的溶液，用已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定自己純化標(biāo)準(zhǔn)品的純度。SRM1649b標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)MS離子化后，檢測(cè)的主要色譜峰即為目標(biāo)化合物的色譜峰，水分、重金屬、其他結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)即使保留時(shí)間一樣也不會(huì)出峰干擾，結(jié)果比較可靠。
?. LC-MS進(jìn)樣后檢測(cè)總離子流，有機(jī)雜質(zhì)可以產(chǎn)生色譜峰，該色譜峰在保留時(shí)間上與目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間會(huì)有差別，從而可以觀察標(biāo)準(zhǔn)品的純度問題。一些在DAD上不響應(yīng)的雜質(zhì)，在MS上會(huì)出峰，從而使測(cè)定的結(jié)果更準(zhǔn)確。但也存在一個(gè)問題，不同化合物離子化效率不同，同樣的濃度會(huì)產(chǎn)生不同的峰面積。
?. LC-MS可以測(cè)定SRM1649b標(biāo)準(zhǔn)品的純度，但必須有對(duì)照品進(jìn)行比較，用已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品外標(biāo)法確定自己標(biāo)準(zhǔn)品的量值，然后換算成純度，屬于外標(biāo)法定量的一種，主要能避免DAD測(cè)定純度過程中雜質(zhì)帶來的干擾。
?. 其實(shí)使用LC/MS技術(shù)也不能*保證準(zhǔn)確測(cè)定純度，LC/MS測(cè)定由于會(huì)受所采用離子化技術(shù)的限制。樣品中某些雜質(zhì)可能在所使用離子化技術(shù)下不能離子化或者離子化效率很低，導(dǎo)致該雜質(zhì)不能檢測(cè)到，測(cè)定純度無法實(shí)現(xiàn)，當(dāng)然如果所測(cè)雜質(zhì)和主成分相關(guān)，一般可采用與主成分相同的離子化方法，結(jié)合適合的色譜分離方法測(cè)定。